ZHRNUTIE A VYSVETLENIE TESTU
Chikungunya je zriedkavá vírusová infekcia prenášaná uštipnutím infikovaným komárom Aedes aegypti.Je charakterizovaná vyrážkou, horúčkou a silnou bolesťou kĺbov (artralgiami), ktorá zvyčajne trvá tri až sedem dní.Názov je odvodený od slova Makonde, čo znamená „to, čo sa ohýba“ v súvislosti so zhrbenou polohou vyvinutou v dôsledku artritických symptómov choroby.Vyskytuje sa v období dažďov
v tropických oblastiach sveta, predovšetkým v Afrike, juhovýchodnej Ázii, južnej Indii a Pakistane.Príznaky sú najčastejšie klinicky nerozoznateľné od symptómov pozorovaných pri horúčke dengue.V Indii bola skutočne hlásená dvojitá infekcia horúčkou dengue a chikungunya.Na rozdiel od horúčky dengue sú hemoragické prejavy relatívne zriedkavé a najčastejšie ide o samoobmedzujúce febrilné ochorenie.Preto je veľmi dôležité
klinicky odlíšiť horúčku dengue od infekcie CHIK.CHIK je diagnostikovaná na základe sérologickej analýzy a vírusovej izolácie u myší alebo tkanivovej kultúry.Imunoanalýza IgM je najpraktickejšia laboratórna testovacia metóda.Rýchly test Chikungunya IgG/IgM využíva rekombinantné antigény odvodené z jeho štruktúrneho proteínu, deteguje IgG/IgM anti-CHIK v sére alebo plazme pacienta do 20 minút.Test môže vykonať nezaškolený resp
minimálne kvalifikovaný personál, bez ťažkopádneho laboratórneho vybavenia.
PRINCÍP
Rýchly test Chikungunya IgG/IgM+NS1 antigénu je laterálna prietoková chromatografická imunoanalýza.Testovacia kazeta pozostáva z IgG/IgM prúžku a NS1 prúžku.
IgG/IgM prúžok: 1) vínovo sfarbený konjugátový vankúšik obsahujúci rekombinantné obalové antigény Chikungunya konjugované s koloidným zlatom (konjugáty horúčky dengue) a králičie IgG-zlaté konjugáty, 2) prúžok s nitrocelulózovou membránou obsahujúci dva testovacie prúžky (prúžky G a M) a kontrolné pásmo (pásmo C).Pás G je vopred potiahnutý protilátkou na detekciu IgG anti-Chikungunya vírus, pás M je potiahnutý protilátkou na detekciu IgM anti-Chikungunya vírusu a pás C je vopred potiahnutý kozím anti-králičím IgG.
NS1 prúžok: 1) vínovo zafarbený konjugátový vankúšik obsahujúci myšací anti-Chikungunya NS1 antigén konjugovaný s koloidným zlatom (Chikungunya Ab konjugáty), 2) prúžok s nitrocelulózovou membránou obsahujúci testovací prúžok (prúžok T) a kontrolný prúžok (prúžok C).Pás T je vopred potiahnutý králičím anti-Chikungunya NS1 antigénom a pás C je vopred potiahnutý kozou anti-myšou IgG protilátkou.
Prúžok IgG/IgM: Keď sa do jamky na vzorku v testovacej kazete nadávkuje primeraný objem testovanej vzorky, vzorka migruje kapilárnym pôsobením cez kazetu.IgG anti-Chikungunya vírus, ak je prítomný vo vzorke, sa naviaže na konjugáty Chikungunya.Imunokomplex je potom zachytený činidlom potiahnutým na páse G, čím sa vytvorí vínový pás G, čo naznačuje pozitívny výsledok testu na IgG vírus Chikungunya a naznačuje nedávnu alebo opakovanú infekciu.IgM anti-Chikungunya vírus, ak je prítomný vo vzorke, sa naviaže na konjugáty Chikungunya.Imunokomplex je potom zachytený činidlom vopred potiahnutým na M prúžku, čím sa vytvorí bordovo sfarbený M prúžok, čo naznačuje pozitívny výsledok testu na IgM vírus Chikungunya a naznačuje čerstvú infekciu.Absencia akýchkoľvek testovacích prúžkov (G a M) naznačuje negatívny výsledok. Test obsahuje vnútornú kontrolu (prúžok C), ktorý by mal vykazovať bordovo sfarbený prúžok imunokomplexu kozieho anti králičieho IgG/
králičieho IgG-zlato konjugátu bez ohľadu na vývoj farby na ktoromkoľvek z T pásov.V opačnom prípade je výsledok testu neplatný a vzorka sa musí znova otestovať iným zariadením.
Strip NS1: Keď sa do jamky na vzorku v kazete nadávkuje primeraný objem testovanej vzorky, vzorka migruje kapilárnym pôsobením cez testovaciu kazetu.Chikungunya NS1 Ag, ak je prítomný vo vzorke, sa bude viazať na konjugáty Chikungunya Ab.Imunokomplex je potom zachytený na membráne vopred potiahnutou králičou anti-NS1 protilátkou, čím sa vytvorí vínový pásik T, čo indikuje pozitívny výsledok testu Chikungunya Ag.Absencia T pásma naznačuje negatívny výsledok.Test obsahuje internú kontrolu (prúžok C), ktorý by mal vykazovať bordovo sfarbený pruh imunokomplexu kozieho anti-myšieho IgG/myšieho IgG-zlatého konjugátu bez ohľadu na prítomnosť farebného T pruhu.V opačnom prípade je výsledok testu neplatný a vzorka sa musí znova otestovať iným zariadením.
